預約儀器:提前幾天預約BECKMANCOVLTER Anvanti JXN-30儀器,以確保實驗能夠順利進行,預約成功后,采取下一步操作。
準備:確認需要清洗的離心桶、離心桶蓋完好無損
清洗:BECKMANCOVLTER Anvanti JXN-30轉頭型號JLA-16-250對應的規格為250ml的低速離心桶,準備4個。離心桶及桶蓋使用去去污劑刷洗干凈以去除雜蛋白,后使用去離子水沖洗干凈。吸取水檢測蛋白濃度,是否符合要求,以及檢測其中的去污劑是否去除干凈,可省略)。
高壓:將離心桶用牛皮紙包好,貼上高壓鍋滅菌(還未查看是否能支持高壓滅菌)
注意:防止離心桶緊貼高壓鍋,防止損壞。
化凍:將500ml的118、124放于25℃水浴鍋中化凍。
開機:趁化凍期間刷卡接通電源,再打開離心機右側電源開關。
放轉子:確認JLA-16-250轉子對準底座后放入
調程序:點擊轉子對應的JLA-16-250所對應的型號,選擇轉速5000rpm,時間10min,4℃。
注意:不要超過離心機所對應的離心轉速范圍。
預冷:蓋上離心機蓋子,然后用雙手按下離心機門,進行預冷。
配平:將要離心的樣品用天平配平,誤差不大于0.1g,配平過程中要包括離心桶的蓋子,密封圈,裝液量要超過離心桶的80%以上。
開蓋:打開離心蓋子時,使用腳踩住開門連鎖裝置,并且雙手輕拂蓋子,防止蓋子被彈開。
離心:離心開始時,注意蓋好蓋子,包括離心機的內腔蓋子和離心機主蓋子,再次確認所使用的離心機轉子型號和所選參數,點擊開始鍵開始離心。
注意:離心速度未達到設定轉速時,不能離開離心機,如果出現警報或者異響,應立即停止,并聯系管理人員。
關機:離心結束后,先關閉離心機右側電源后刷卡下機。
歸位:使用完的物品清洗干凈后,放回原位,并做好登記。
取上清:準備一個干凈的500ml瓶子,將上清倒入500ml瓶中,并標記好名稱、日期,離心后產物,存貯方式。
收集沉淀,將離心桶中的細胞沉淀收集到合適的EP管中,標記名稱、日期、離心后產物。